Lena Roth wurde 1990 in Bad Friedrichshall, in der Nähe von Heilbronn, geboren und studierte an der Universität Tübingen Empirische Kulturwissenschaft und Italienisch. Ihre Liebe zum Theater entdeckte sie als Souffleuse bei den Burgfestspielen Jagsthausen. Als Regieassistentin war sie an mehreren Theatern, unter anderem bei den Burgfestspielen Jagsthausen, am Altonaer Theater, den Hamburger Kammerspielen und am Ohnsorg Theater tätig. Von 2020 bis 2024 war Lena Roth als Regieassistentin an den Schauspielbühnen beschäftigt und gab in der Spielzeit 2023/2024 mit „Das Tagebuch der Anne Frank“ ihr Regiedebüt im Theater unterm Dach des Alten Schauspielhauses. Diese Inszenierung wird 2024/2025 wieder aufgenommen.